引 言

自身免疫性神经系统疾病的精准诊疗，与高灵敏度、高特异性的抗体检测密切相关。近年来，国内外指南与文献持续更新，进一步规范了AQP4、MOG、AChR、MuSK抗体的检测策略，并优先推荐Live CBA检测方法。为紧跟指南更新、优化检测体系，宏望医学完成Live CBA抗体检测矩阵升级，检测范围涵盖AQP4、MOG、AChR、MuSK抗体，致力于提供更规范、更精准的抗体检测服务。

AQP4抗体

视神经脊髓炎谱系疾病（neuromyelitis optica spectrum disorders，NMOSD）是一种以视神经和脊髓受累为主的中枢神经系统自身免疫性炎性疾病，80%以上的患者体内存在针对水通道蛋白4（aquaporin-4，AQP4）的自身抗体免疫球蛋白G（AQP4-IgG）。NMOSD的发病机制主要与致病性AQP4-IgG相关，AQP4-IgG攻击中枢神经系统内的星形胶质细胞，造成严重的轴索损害和脱髓鞘反应，是不同于多发性硬化（multiple sclerosis，MS）和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（myelin oligodendrocyte glycoprotein，MOG）抗体相关疾病（MOG antibody -associated disease，MOGAD）的独立疾病实体。 

在中国有70%~80%的NMOSD患者出现AQP4抗体阳性，西方国家则有超过80%的NMOSD患者出现AQP4抗体阳性。AQP4抗体阳性的NMOSD患者比抗体阴性的患者复发风险高，血清AQP4抗体滴度与患者的疾病活动度无关，但可提示疾病在发作期的严重程度。在急性期使用免疫治疗后其滴度可能会降低，可作为治疗疗效的评价指标。如果发现患者临床症状符合NMOSD，但AQP4抗体阴性，则需要注意疾病的复杂性以及检测方法的局限性等因素影响。2025中国视神经脊髓炎谱系疾病诊断与治疗指南
抗体检测应尽量在免疫治疗开始前采集标本，血清是AQP4-IgG测定的首选生物样本。 AQP4-IgG需通过基于细胞底物的实验（cell based assay，CBA）法进行检测（Ⅰ级推荐，A级证据）。该方法使用表达构象完整、全长重组人AQP4蛋白的固定或活细胞作为抗原底物，并使用转染的（或至少是非转染的）细胞作为对照底物。福尔马林固定的CBA 法较易推广，但基于活细胞的CBA法（live-CBA）敏感度稍高。两种检测方法均可使用。需要用相同方法检测血和脑脊液MOG-IgG。以啮齿类动物或灵长类动物中枢神经组织切片为底物的免疫组织化学法、直接和间接酶联免疫吸附试验、荧光免疫共沉淀、免疫印迹和放射免疫共沉淀等方法过去都曾使用过，但整体敏感度和（或）特异度不如CBA，因此不再推荐用于临床常规检测。第41届欧洲多发性硬化治疗与研究委员会大会（ECTRIMS 2025）IPND-NMOSD诊断标准进展1、参考标准：基于细胞底物的活细胞法检测（Live cell-based assay, LCBA）；2、基于细胞底物的固定细胞法检测（Fixed CBA）结果为阳性时，无需再通过Live CBA验证；3、不推荐使用ELISA，若已采用ELISA检测，结果需验证（优先通过Live CBA验证）；4、重新检测建议：若初始样本检测结果为阴性，且满足以下任一条件，需在后续检测中重新取样：（1）初始检测方法不是LCBA；或（2）样本采集时间处于急性发作期外；或（3）在可能干扰治疗后采集的样本。

MOG抗体

中枢神经系统髓鞘由少突胶质细胞膜向外延伸、围绕轴突而形成。髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（myelin oligodendrocyte glycoprotein，MOG）表达于少突胶质细胞膜，富集于髓鞘板层的外层，约占CNS髓鞘蛋白的0.05%。2007年，O ′Connor 等发现以自然折叠的MOG抗原为底物所测得的抗体具有独特的临床意义：这种能识别MOG抗原空间构象的抗体在19% 的急性播散性脑脊髓炎（ADEM）患者中检出，提示MOG抗体与非多发性硬化（MS）的脱髓鞘疾病存在关联。目前，以人全长MOG基因转染细胞为基质的间接免疫荧光法或流式细胞术，成为普遍认可的MOG抗体检测手段。

MOG抗体阳性率为7.4%，对于诊断MOGAD具有重要价值。抗MOG抗体阳性的患者约占AQP4抗体阴性NMOSD 患者的20%~40%。MOG抗体多在视神经炎和（或）脊髓炎患者中存在，但在经典MS中很少存在，在ADEM疾病中尤其是儿童ADEM患者中大约40%存在抗MOG抗体阳性。建议在解释非典型症状的低滴度（界限值1：20）患者时要谨慎，会存在一定临床不符。高滴度的MOG抗体更特异性地存在于儿童ADEM患者的血清中。血清滴度取决于疾病活动和治疗状态，在长期随访过程中，研究者发现儿童ADEM患者中抗体滴度会逐渐降低甚至转为阴性，其下降趋势往往提示ADEM 患者良好的临床预后，但在NMOSD或MS患者中，滴度多数持续在原有水平波动且出现了再次增高。

2025中国髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病诊断与治疗指南

推荐使用转染人全长MOG基因的基于细胞底物的实验（cell-based assay，CBA）检测法，于显微镜观察半定量结果。MOG-IgG主要是IgG1类抗体，检测中建议使用IgG Fc或IgG1特异性二抗。推荐使用基于活细胞的CBA（live-CBA）。无法进行live-CBA时，可选择基于固定细胞的CBA（fixed-CBA），但其特异度和敏感度与live-CBA 有一定差异。不推荐使用酶联免疫吸附法（ELISA）检测MOG-IgG。

AChR抗体、MuSK抗体

重症肌无力（myasthenia gravis，MG）是获得性神经-肌肉接头传递障碍的自身免疫性疾病。乙酰胆碱受体（AChR）抗体是最常见的致病性抗体，此外，针对突触后膜其他组分，包括肌肉特异性酪氨酸激酶受体（MuSK）、脂蛋白受体相关蛋白4（LRP4）等抗体均可干扰AChR聚集、影响AChR功能及神经-肌肉接头信号传递，参与MG的发生发展。

2025中国重症肌无力诊断和治疗指南

AChR 抗体可选用RIA、CBA和ELISA进行检测，由于CBA检测相对于RIA和ELISA具有更高的诊断准确度，建议在条件允许的情况下优先选择CBA；若ELISA或RIA的检测结果为阴性，建议用CBA进一步验证或结合临床表现和其他辅助检查进行综合判定（证据等级：Ⅱb级，推荐等级：B 级）。

MuSK抗体可选用RIA、ELISA和CBA进行检测，建议在条件允许的情况下优先选择CBA检测。若ELISA或RIA 的检测结果为阴性，建议用CBA进一步验证，或结合临床表现和其他辅助检查进行综合判定（证据等级：Ⅱb级，推荐等级：B级）。

Comparison of Fixed and Live Cell-Based Assay for the Detection of AChR and MuSK Antibodies in Myasthenia Gravis

背景与目的 活细胞CBA（Live CBA）可在部分放射免疫法（RIA）血清双阴性重症肌无力（dSN-MG）患者中检出AChR或MuSK抗体。目前已有商品化固定细胞CBA（Fixed CBA）用于AChR、MuSK抗体检测，但二者的直接对比研究尚不充分。本研究在RIA检测血清双阴性MG患者中比较固定细胞CBA与活细胞CBA的检测效能，并评估两种方法在RIA阳性样本中的灵敏度及特异度。

方法 采用Live-CBA与Fixed-CBA对意大利两家MG中心的292份血清样本进行了AChR和MuSK抗体检测，其中MG患者192例、对照组100例；所有样本均经 RIA 检测：AChR抗体阳性66例、MuSK抗体阳性40例、双阴性86例，对照均为阴性。由两名独立评估者判读CBA结果，采用McNemar检验比较两种方法，用Cohen’s kappa或组内相关系数（ICC）判断评估者间与实验室间一致性。

结果 在86份RIA-dSN-MG样本中，Fixed CBA检测到10例抗体（11.6%，95% CI 5.7-20.3），而Live CBA检测出16例抗体，（18.6%，95% CI11.0-28.5）（p=0.0143）。在这些血清中，Fixed CBA阳性者，Live CBA也阳性。另外，Live CBA可以在4份Fixed CBA阴性的样本中检测到MuSK抗体，在2份Fixed CBA阴性样本中检测出AChR抗体，Live CBA抗体检测率进一步提高8%（95% CI 2.9-16.6）。流式细胞术验证了这些结果。在RIA阳性队列中，Fixed CBA对AChR抗体的敏感性为98.5%（95% CI 91.9-99.9），Live CBA对其敏感性为100%（95% CI 94.6-100）（p=0.1573）。对于这两种检测方法，MuSK抗体的敏感性为100%（95% CI 91.2-100），特异性为100%（95% CI 96.4-100）。对于Live CBA和Fixed CBA（Cohen’s kappa分别为0.972和0.978），评估者之间的分数几乎一致，类似于实验室间一致性。对于Live CBA和Fixed CBA，评估者间一致性近乎完美（Cohen‘s kappa值分别为0.972和0.978），实验室间一致性亦良好。CBA评分的评估者间一致性范围为良好至优异（ICC：0.832–0.973）。

讨论 Fixed CBA是RIA之外检测MG患者AChR、MuSK抗体的有效方法，可作为初步诊断检测手段。Live CBA对RIA及Fixed CBA均阴性的样本具有补充诊断价值。

采用Live CBA检测，可在细胞表面模拟体内状态过表达聚集型AChR或MuSK。该方法不仅被证实比RIA灵敏度更高，且特异性极强。固定处理可导致蛋白质三级结构改变，进而可能掩盖关键抗原表位，最终阻碍低亲和力抗体的结合。

参考文献

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[2] 中华医学会神经病学分会神经免疫学组. 中国髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病诊断与治疗指南（2025版）[J].中华神经科杂志,2025,58(7):704-720. 

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[4] 《中国眼肌型重症肌无力临床诊疗专家共识（2025）》专家组,中华医学会眼科学分会神经眼科学组,中国研究型医院学会神经眼科专业委员会. 中国眼肌型重症肌无力临床诊疗专家共识（2025）[J]. 中华眼底病杂志,2025,41(12)：907-921.

[5] Dean M. Wingerchuk. IPND 2025 diagnostic criteriafor NMOSD.Presented at ECTRIMS 2025, Barcelona, Spain.

[6] Spagni G, Gastaldi M, Businaro P,et al. Comparison of Fixed and Live Cell-Based Assay for the Detection of AChR and MuSK Antibodies in Myasthenia Gravis.Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm. 2022 Oct 21;10(1):e200038.